生化危机0是对生化危机1的前传，讲述了浣熊市爆发T病毒后的前夕，浣熊市警局特别战术和救援服务（S.T.A.R.S.）Bravo小队的遭遇。生化危机1则讲述了浣洋市事件爆发后的故事，主角是S.T.A.R.S. Alpha小队的成员。
可玩角色生化危机0中可操作的角色有比利·科恩和瑞贝卡·钱伯斯。比利是一名逃犯，瑞贝卡是一名菜鸟警官。生化危机1中可操作的角色有克里斯·雷德菲尔德、吉尔·瓦伦丁、巴瑞·伯顿和阿尔伯特·威斯克。
游戏机制生化危机0引入了新的游戏机制，如双人合作模式和背包物品管理系统。双人模式允许玩家同时控制两名角色，协同作战。背包物品管理系统使玩家可以管理物品，并通过不同组合创造新的物品。
设定生化危机0的设定在浣熊市训练设施附近，时间上比生化危机1早。生化危机1的设定在浣熊市洋馆和浣熊市城区，时间上在生化危机0之后。
敌人类型生化危机0和1中的敌人类型有相似之处，如丧尸和僵尸犬，但也有一些不同的敌人。例如，生化危机0中的蛭人是一种变异生物，而生化危机1中没有。生化危机1中的巨大蜘蛛和暴君是该系列的标志性怪物。
游戏难度生化危机0被认为比生化危机1更难，因为需要管理两个角色，而且弹药和资源更加有限。生化危机1的难度则相对较低，但仍然需要玩家仔细规划和战略思考。
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